Mutacje P450c21 (steroidowa 21-hydroksylaza) w Cys428, Val281 i Ser268 powodują całkowitą, częściową lub brak utraty aktywności enzymatycznej.

Niedobór 21-hydroksylazy steroidowej jest główną przyczyną wrodzonej hiperplazji nadnerczy (CAH), powszechnej choroby genetycznej. Aby określić związek między mutacjami genów i niedoborem enzymu, wygenerowaliśmy mutacje missense cDNA 21-hydroksylazy w trzech różnych miejscach i scharakteryzowaliśmy zmutowane białka po ekspresji w hodowanych komórkach ssaczych i drożdżowych. Wśród nich stwierdzono, że Ser268 i Val281 są zmutowane u pacjentów z CAH, podczas gdy Cys428 uważa się za ligand hemu. Nasze wyniki pokazują, że mutacje w tych miejscach powodują całkowitą, częściową lub brak utraty aktywności enzymatycznej. Wszystkie mutanty Cys428 nie wykazywały ani aktywności enzymatycznej, ani absorpcji P450, co potwierdza pogląd, że Cys428 jest ligandem hemu. Wszystkie mutanty 268 wykazywały taką samą aktywność jak normalna 21-hydroksylaza, co pokazuje, że klinicznie obserwowana zmiana Ser268 —- Thr reprezentuje polimorfizm, a nie przyczynę niedoboru enzymu. Mutanty 281 miały normalne wartości Km, ale znacznie zmniejszone wartości Vmax, które również były równoległe do redukcji zawartości hemu, w kolejności Val281 (normalna, 100%) większa niż Ile281 (50%) większa niż Leu281 (20%) większa niż Thr281 ( 10%). Nasze odkrycia sugerują, że grupa metylowa przy węglu beta Val281 jest wymagana do włączenia hemu, a w konsekwencji aktywności enzymatycznej.
[hasła pokrewne: ile kosztuje wazektomia, jasno brązowy stolec, kiretaż zamknięty ]